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DNA/RNA氣溶膠污染防治方案

    PCR擴增過程中會產(chǎn)生DNA/RNA氣溶膠污染的問題。較其微量的氣溶膠污染即可造成假陽性的結(jié)果,進而可能引起整個PCR實驗室的污染,嚴(yán)重的甚至要關(guān)閉實驗室。目前治理氣溶膠污染的常規(guī)方法有:酒精擦拭、紫外線照射、高壓變性。這三種方法都存在巨大缺陷。
    朗司醫(yī)療是一家專業(yè)從事分子診斷產(chǎn)品的研發(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)的創(chuàng)新型高科技企業(yè),在經(jīng)過有效實驗數(shù)據(jù)論證之后,建議您采取以下措施防治DNA/RNA氣溶膠污染:
    1、設(shè)置陰性對照:必須設(shè)置一個不含模板DNA但含有PCR系統(tǒng)中所有其他成分的對照反應(yīng)(陰參/空白對照),時刻注意污染的監(jiān)測,判斷有無污染,是什么原因造成的污染,以便采取措施,防止和消除污染。
    2、實驗室分區(qū):PCR實驗室按 《醫(yī)療機構(gòu)臨床擴增實驗室管理辦法》 (衛(wèi)辦醫(yī)政發(fā)〔2010〕194號)規(guī)定進行分區(qū),工作和空氣流向都嚴(yán)格按照試劑準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→PCR擴增區(qū)→產(chǎn)物分析區(qū)。
    3、提高規(guī)范操作意識:定期組織全員進行防污染安全培訓(xùn),宣講PCR實驗室操作規(guī)范,印發(fā)并講解《醫(yī)療機構(gòu)臨床擴增實驗室管理辦法》(衛(wèi)辦醫(yī)政發(fā)〔2010〕194號)、《關(guān)于做好血站核酸檢測工作的通知》(國衛(wèi)辦醫(yī)發(fā)〔2015〕11號)、《血站核酸檢測實驗室質(zhì)量保證指南》、 《法庭科學(xué)DNA實驗室規(guī)范》(GA/T382-2002)、《法庭科學(xué)DNA實驗室檢驗規(guī)范》(GA/T383-2002)等文件。
    4、常規(guī)操作清潔:在樣本處理前后,使用朗司醫(yī)療的PCR_Cleaner清潔設(shè)備、耗材、操作臺,同時有效降解95%以上的DNA氣溶膠污染、99%以上的RNA氣溶膠污染。
    5、重點清潔:安排保潔員使用朗司醫(yī)療的PCR_Cleaner對重點區(qū)域、核酸提取儀、PCR儀、離心機等進行清潔操作,確保氣溶膠污染沒有累積。
    6、月度清潔:有計劃進行月度大清理,使用PCR_Cleaner對**凈工作臺,實驗桌,地面以及門,玻璃、實驗服、記號筆等進行大面積清除操作。
    7、紫外照射:每天工作完畢紫外線照射工作區(qū)30分鐘,用全自動核酸提取儀提取核酸后應(yīng)將紫外線照射延長到8小時。
    特別注意:
    1、	對污染的監(jiān)控很重要:安排質(zhì)控員記錄陽性率及假陽性的發(fā)生頻率,及時發(fā)現(xiàn)異常;同時采集環(huán)境中的樣本進行核酸污染分析(朗司醫(yī)療可提供污染溯源技術(shù)指導(dǎo),提供必要的技術(shù)手段,盡早發(fā)現(xiàn)污染源,盡快清除污染
    2、	有效的應(yīng)急處理很關(guān)鍵:若您所在的PCR實驗室發(fā)生以下情況(陽性率異常升高,空白對照(陰參)頻繁出現(xiàn)假陽性,發(fā)現(xiàn)未知擴增條帶重復(fù)出現(xiàn)),較有可能發(fā)生了核酸氣溶膠的突發(fā)性污染,可以使用PCR_Cleaner進行緊急污染源的排除和清理。
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