常州武進(jìn)化學(xué)試劑教你如何選擇液相色譜固定相
時(shí)間：2015-12-05作者：常州市武進(jìn)化學(xué)試劑有限公司瀏覽：90
反相液相色譜可供選擇的固定相種類(lèi)繁多令人眼花繚亂，即使是某一種固定相（例如C18）的可選擇種類(lèi)也是很多的。
老實(shí)說(shuō)，我們的很多方法開(kāi)發(fā)都是在嘗試和錯(cuò)誤中進(jìn)行，這些都是基于我們喜愛(ài)的供應(yīng)商提供的成熟的或者新興的固定相。即使是先進(jìn)的含有仔細(xì)考量的正交化及電腦優(yōu)先洗脫設(shè)計(jì)的“篩選”平臺(tái)，有時(shí)也不得不采取“色譜的本能”。
反相色譜中的保留是基于被分析物、流動(dòng)相、鍵合相以及鍵合了配體的硅膠表面的活性和其可接觸性之間的平衡。 想要搞清楚影響分離效果的保留機(jī)理，就要考慮并明確化學(xué)鍵合相、活性硅膠表面的處理、硅膠表面的可接觸性等因素，這些都將影響色譜柱的原始選擇性及方法開(kāi)發(fā)的優(yōu)化。
在大多數(shù)反相分離中色散作用是起主要作用的，尤其是那些使用未改性的烷基配體（C18、C8、C4），其保留能力是與被分析物的疏水性成正比的。含有芳香基團(tuán)或不飽和基團(tuán)的固定相或被分析物進(jìn)行分析時(shí)，電荷轉(zhuǎn)移（或π-π）作用是起主要作用的。偶極-氫鍵相互作用對(duì)于極性化合物的保留是很重要的，含有“氰基”的固定相會(huì)增強(qiáng)對(duì)極性化合物的保留。被分析物的電離部分與硅膠表面之間存在靜電作用力，這是由于硅膠表面有殘留的可離子化的硅醇基。
當(dāng)前有許多色譜柱分類(lèi)系統(tǒng)存在，這些系統(tǒng)都是基于對(duì)已知化學(xué)探針物質(zhì)的檢測(cè)，從而來(lái)描述固定相的獨(dú)特特性。一個(gè)非常有用的例子就是美國(guó)藥典（USP）網(wǎng)站中的產(chǎn)品質(zhì)量研究數(shù)據(jù)庫(kù)（也就是PQRI系統(tǒng)），網(wǎng)址是：。該數(shù)據(jù)庫(kù)采用保留（1,2）的疏水減法模型來(lái)描述固定相的疏水性（H），判斷疏水性類(lèi)似而有不同形狀或流體力學(xué)體積的被分析物的空間結(jié)構(gòu)選擇性參數(shù)（S）,在pH值為7.0和2.8時(shí)的氫鍵（作為路易斯酸或路易斯堿）和靜電作用參數(shù)（C）。pH值為7.0時(shí)硅醇基活性很強(qiáng)，pH為2.8時(shí)具有酸性的硅醇基將會(huì)與極性或可離子化的被分析物發(fā)生作用產(chǎn)生拖尾。獨(dú)特的或正交的固定相一般會(huì)有較大的S、B和C（7.0）值。這些大型的數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)于比較固定相的特點(diǎn)是很有用的，“雷達(dá)圖”也是另一種比較固定相特點(diǎn)的有用方式。
表一總結(jié)了一些當(dāng)前常用固定相的分類(lèi)及其相關(guān)應(yīng)用領(lǐng)域。
表一：一些主要固定相分類(lèi)及其主要應(yīng)用
固定相
配體
應(yīng)用
C18（烷基）
-C18H37
大多數(shù)烷基固定相可保留藥物，類(lèi)固醇，脂肪酸，鄰苯二甲酸酯，環(huán)境污染物
極性嵌入C18
-C16H33NO
對(duì)氨基甲酸酯及其類(lèi)似物質(zhì)等極性強(qiáng)的被分析物保留更強(qiáng)，能夠達(dá)到更好的分離效果。
氰基（氰丙基）
-(CH2)3CN
對(duì)于極性化合物及有多重不同化學(xué)成分的溶質(zhì)有獨(dú)特的選擇性
苯基（二苯基）
-C6H5(-C12H9)
芳香族和中等極性化合物